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儀器分析方法檢測 |
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長期使用抗生素會造成畜禽免疫力下降，引起畜禽內(nèi)源性感染和殘留，而食用過抗生素超量的畜產(chǎn)品的人，會產(chǎn)生抗藥性，或大量蓄積而對機體產(chǎn)生毒害。近年，牛奶中的抗生素殘留成為人們?nèi)找骊P(guān)注的話題。
奶牛乳腺炎是世界奶牛養(yǎng)殖業(yè)中發(fā)病率最高、流行最快、造成損失最大的疾病之一。根據(jù)美國奶協(xié)統(tǒng)計，亞臨床型奶牛乳腺炎發(fā)病率高達50%，而總發(fā)病率可占整個牛群的70%。
抗生素是目前國內(nèi)外普遍采用的一種治療奶牛乳腺炎的手段。歐美等國多年前明文禁止抗生素殘留超量的牛奶上市。1990至1991年期間，美國奶業(yè)基金會規(guī)定超過允許量標準的牛乳及其乳品全部廢棄處理，不得食用。近年來，我國也頒布了相關(guān)管理條例，但是牛奶中抗生素殘留問題仍然不時發(fā)生。
目前抗生素的檢測方法，按照檢測原理和使用的儀器可分微生物法、免疫法、理化儀器法等3類：
微生物測定原理是根據(jù)抗生素對微生物的生理機能、代謝的抑制作用，來定性或定量確定樣品中抗微生物藥物殘留。微生物法的優(yōu)點是費用低，一般實驗室都能操作。缺點是時間長、顯色狀態(tài)判斷通過肉眼辨別、易產(chǎn)生誤差、對微紅色者無法做出準確判斷、操作復雜。
免疫分析技術(shù)最突出的優(yōu)點是操作簡單，速度快、分析成本低。免疫測定法取樣量小，前處理簡單、容量大，儀器化程度低，檢測牛奶的靈敏度高。是目前奶牛場和牛奶公司使用最廣泛、快速、靈敏的檢測抗生素殘留的方法。目前部分抗生素已經(jīng)建立了免疫測定法，如磺胺二甲基嘧啶、氯霉素、沙拉沙星、鏈霉素、四環(huán)素、莫能菌素等。該法適用于現(xiàn)場監(jiān)控和大量樣品的篩選，具有廣闊的應用前景。但是免疫法直接測定也存在樣本信息量太少，假陽性和理化分析技術(shù)選擇性低等不足，當樣品中含有與某類抗生素結(jié)構(gòu)相似的化合物時，可能出現(xiàn)免疫交叉反應而呈現(xiàn)假陽性結(jié)果。
最常用的理化儀器分析方法是高效液相色譜和質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)。高效液相色譜法(HPLC)是目前廣泛應用的一種理化檢測方法，分離速度快、效率高和操作可自動化，已成為大多數(shù)抗生素殘留的常規(guī)分析方法。由于奶樣品中藥物殘留量少，背景干擾往往很嚴重，因此一般都通過柱前衍生反應來提高紫外檢測器檢測殘留的靈敏度。目前，HPLC方法已用于紅霉素、慶大霉素、羧芐青霉素和吩羧青霉素殘留的測定。
近期，國外在抗生素殘留檢測方法上正在由各種分析技術(shù)聯(lián)用代替單一的色譜技術(shù)。例如檢測氯霉素的聯(lián)用技術(shù)有液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)、氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)、高效液相色譜/光陣列檢測器(HLPC/PAD)、氣相色譜/電子捕獲檢測器(GC-ECD)等，目前LC-MS已進入實用階段。
目前國家食品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗中心研制出一種液相色譜/離子阱多級質(zhì)譜聯(lián)用儀，它可完成對復雜基體的定性及定量分析。適于分析食品、小分子量藥物、藥物代謝產(chǎn)物、農(nóng)藥、除草劑等樣品。
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